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—— 中国食品杂志社
分离筛选高产转糖基活性β-半乳糖苷酶的乳源微生物，为高效合成低聚半乳糖（galacto-oligosaccharides，GOS）提供新酶源。以添加5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷（X-Gal）的乳糖为碳源的乳酸细菌培养基（MRS）进行初级分离筛选，以产酶菌株粗酶液催化乳糖转糖基反应产物的薄层层析进行复筛，单因素优化最佳产酶条件和转糖基反应条件，硫酸铵分级沉淀纯化β-半乳糖苷酶并对其酶学特性进行初步分析。筛选获得产转糖基活性β-半乳糖苷酶乳酸菌20 株，选择产酶水平较高、转糖基活性最强的产β-半乳糖苷酶菌株L6进行进一步研究。生理生化和分子生物学鉴定确定L6菌株为Lactobacillus kefiri。该菌株在2 g/100 mL乳糖、1 g/100 mL氮源（蛋白胨、牛肉膏和酵母浸粉）及初始pH 5.5的条件下，37 ℃培养20 h，产酶水平最高可达（3.81±0.02）U/mL。L6菌株所产β-半乳糖苷酶催化反应的温度范围较宽，45～70 ℃均能保持50%以上相对酶活力。以45 g/100 mL乳糖为底物，该酶在65 ℃、pH 7.0条件下，反应4 h生成转移二糖的得率为13.51%（m/m，下同），转移三糖为13.85%，转移三糖以上的GOS为4.15%。
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