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牛β-防御素BNBD11基因在大肠杆菌中的表达
来源：食品科学网 阅读量: 112 发表时间: 2017-06-07
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作者: 赵建乐,陈琛,闫茂仓,张小莺,李引乾,张三东
关键词: 牛中性粒细胞β-防御素11（BNBD11）|融合表达|大肠杆菌
摘要:

探索牛β-防御素BNBD11原核表达及纯化的技术路线。根据已报道的BNBD11的氨基酸序列，兼顾大肠杆菌密码子偏好性，设计合成BNBD11基因。构建重组表达载体pET32a-BNBD11，转入E.coli BL21，用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达。经SDS-PAGE检测融合蛋白结果显示，大部分表达产物以可溶形式存在，用Ni Sepharose柱层析纯化融合蛋白。融合蛋白经甲酸切割后，再次用Ni Sepharose柱层析去除带有His-Tag的杂蛋白，最终得到纯化的重组BNBD11。实验实现了BNBD11在大肠杆菌中的融合表达，并纯化了获得的重组BNBD11。

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