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苯甲酸人工抗原的合成与免疫效价的测定
来源:食品科学网 阅读量: 95 发表时间: 2017-06-07
作者: 赵 伟,魏晨曦,夏 莹,杨 旭,丁书茂,袁均林*
关键词: 苯甲酸|邻苯二甲酸酐|人工抗原|抗体
摘要:

通过苯甲酸的衍生物邻苯二甲酸酐(PA)的氨解法将苯甲酸(BA)偶联到载体蛋白上合成苯甲酸的人工抗原:免疫原苯甲酸- 鸡卵清蛋白(BA-OVA)和包被原苯甲酸- 牛血清白蛋白(BA-BSA)。通过紫外光谱扫描、红外光谱扫描及SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法检测鉴定人工抗原,并用免疫原(BA-OVA)免疫BALB/c 小鼠,检测抗体的生成。结果表明,苯甲酸人工抗原的合成成功。根据邻苯二甲酸酐、人工抗原和载体蛋白的紫外吸收值,计算出免疫原中苯甲酸(BA)与载体鸡卵清蛋白(OVA)的偶联比约为174:1。免疫小鼠血清中的抗体通过ELISA法检测为阳性(血清效价达到了1: 3.2 × 105),表明合成的抗原已诱导出针对苯甲酸的特异性抗体生成,为进一步的苯甲酸单克隆抗体制备和免疫检测提供可靠的免疫原。

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