目的:研究苯乳酸和醋酸联用对单核细胞增生李斯特菌的协同抑菌活性及对细胞膜、DNA损伤的机理。方法:通过二倍稀释法考察苯乳酸和醋酸对单核细胞增生李斯特菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和部分抑菌浓度指数;采用平板菌落计数法绘制时间-杀菌曲线;从Zeta电位、膜电势、细胞膜完整性、细胞超微结构、DNA等方面考察苯乳酸和醋酸对单核细胞增生李斯特菌的抑菌机制。结果:苯乳酸和醋酸对单核细胞增生李斯特菌的MIC分别为2.25、1.75 mg/mL,苯乳酸与醋酸组合的部分抑菌浓度指数为0.5,表明苯乳酸与醋酸对单核细胞增生李斯特菌的抑制具有协同效应;Zeta电位结果显示苯乳酸与醋酸有效改变了细胞表面电荷;通过DiSC3(5)荧光探针标记考察膜电势的变化,表明苯乳酸与醋酸能消散膜电势;流式细胞仪和荧光显微镜分析得出苯乳酸与醋酸破坏细胞膜完整性;经MIC苯乳酸、MIC醋酸及1/4 MIC苯乳酸+1/2 MIC醋酸作用后,单核细胞增生李斯特菌菌体变形、出现黏连、内容物泄出;琼脂糖凝胶电泳结果表明苯乳酸和醋酸可损伤DNA。结论:苯乳酸和醋酸联用可使细胞表面电荷减少,细胞膜电势消散,破坏细胞膜完整性,从而进入细胞与DNA发生相互作用使细胞死亡,进而发挥协同抑菌作用。本研究为苯乳酸用于食品保鲜防腐提供了理论参考。
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