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鹅骨胶原蛋白钙螯合肽的分离纯化及结构鉴定
来源:食品科学网 阅读量: 95 发表时间: 2020-12-03
作者: 周名洋,何雨欣,孙杨赢,潘道东,曹锦轩
关键词: 鹅骨胶原蛋白;钙螯合肽;液相色谱-串联质谱;氨基酸组成;紫外光谱;傅里叶红外光谱
摘要:

利用碱性蛋白酶酶解鹅骨胶原蛋白制备钙螯合肽,通过SephadexG-25凝胶色谱及反向高效液相色谱对钙螯合肽进行分离纯化,并采用氨基酸自动分析仪、液相色谱-串联质谱、紫外吸收光谱(ultro violet spectroscopy,UV)和傅里叶红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)进行氨基酸组成和结构鉴定。经鉴定鹅骨胶原蛋白钙螯合肽富含Glu(12.67%)和Asp(7.47%),氨基酸序列为DSYVGDEAQSKR和KLLDEGR,分子质量分别为1 353.62 u和829.47 u。经合成验证,DSYVGDEAQSKR和KLLDEGR的钙螯合能力分别为(70.08±2.20)mg/g和(68.18±1.31)mg/g,UV和FTIR结果表明DSYVGDEAQSKR和KLLDEGR与钙离子螯合后,紫外吸收强度降低、酰胺胺I带和酰胺II带红移和N—H键蓝移,推测多肽氨基酸残基上的羧基和氨基是螯合钙离子的主要位点。

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