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基于衍生化3-氨基-2-恶唑烷酮的夹心酶联免疫分析
来源:导入 阅读量: 115 发表时间: 2024-04-29
作者: 张世伟,吴会玲,周迎春,王炳志,杨星星,杜业刚,汤璐,冯荣虎,郭继平
关键词: 3-氨基-2-恶唑烷酮;夹心酶联免疫分析;表位间隔距离;辣根过氧化物酶标记亲和素
摘要:

建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗AOZ单克隆抗体并以辣根过氧化物酶标记的亲和素或抗生物素抗体作为第二结合物可实现AOZ的夹心酶联免疫吸附检测(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)。从实际应用的角度,得到双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下两个表位的极限距离,分别为12 Å和13 Å,理想距离分别为16 Å和17 Å。在双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下的检出限分别达到1.8 pg/mL和0.8 pg/mL(以AOZ质量浓度计),相对于竞争ELISA,其灵敏度最高提高了25 倍。平均回收率为73%~85%,平均相对标准偏差为9.0%。

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