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豆豉纤溶酶基因的异源表达及其重组菌在淡豆豉中的应用
来源:导入 阅读量: 19 发表时间: 2025-02-18
作者: 徐菁雯,乌日娜,王伟明,阎亦然,向雪琴,赵玉莲,武俊瑞,王亚琦,邓丽,童星,史海粟
关键词: 豆豉纤溶酶;异源表达;毕赤酵母;淡豆豉
摘要:

从不同来源及不同发酵阶段的淡豆豉中分离筛选出65 株优势菌,通过酶联免疫吸附法测定纤溶酶活性,得到一株高产纤溶酶的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)20-1,并扩增其纤溶酶基因,在毕赤酵母中异源表达,获得高产纤溶酶的重组菌株Pichia pastoris pPIC9K-his-aprEBS2,重组菌中该基因表达水平是出发菌株的5.8 倍,培养48 h后纤溶酶活性达到(3 025.59±201.27)U/mL,是出发菌株的8.9 倍;经优化,其活性可达(8 698.24±180.73)U/mL。通过急性毒性实验证明,该重组菌无毒。利用该重组菌纯种发酵淡豆豉,淡豆豉中纤溶酶活性达到(17 287.02±103.20)U/g,通过理化指标监测、感官特性分析及电子舌分析,重组菌可以提高淡豆豉的感官及风味。重组菌发酵的淡豆豉成品血栓溶解率可达到(60.55±1.58)%,高于市售淡豆豉。

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