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—— 中国食品杂志社
本研究以豌豆蛋白为原料，经酶解、分离纯化制备豌豆蛋白水解物，并分析其基础理化性质，其蛋白质量分数为（89.43±3.03）%，肽质量分数为（75.72±1.65）%，分子质量＜1 000 Da的组分占比90.39%。利用高效液相色谱-质谱联用技术鉴定出3 条核心肽段：缬氨酰-丙氨酸（Val-Ala，VA）、苯丙氨酰-脯氨酰-色氨酸（Phe-Pro-Trp，FPW）、色氨酰-脯氨酰-苯丙氨酸（Trp-Pro-Phe，WPF）。通过分子对接技术分析肽段与二肽基肽酶-IV（dipeptidyl peptidase-IV，DPP-IV）的靶向结合作用，结果显示，FPW、WPF均能对接至DPP-IV的S2活性口袋，其相互作用位点与阳性对照异亮氨酰-脯氨酰-异亮氨酸（Ile-Pro-Ile，IPI）的作用位点高度相似。在LibDOCK对接模式下，FPW、WPF的得分均高于IPI，而VA得分低于IPI。进一步对得分最高的FPW与DPP-IV复合物进行100 ns分子动力学模拟，结果显示复合物的均方根偏差、回旋半径及氢键数量均保持稳定，结合自由能为（－43.53±0.23）kJ/mol，表明二者结合稳定且亲和力强。体外DPP-IV抑制实验表明，FPW、WPF和VA均能抑制DPP-IV活性，且呈剂量依赖性，在20 mg/mL质量浓度条件下抑制率分别达（99.03±0.89）%、（98.54±0.60）%和（94.14±1.05）%。本研究鉴定了豌豆DPP-IV抑制肽FPW、WPF、VA，通过分子对接验证了3 条肽段的靶向结合能力，分子动力学模拟证实FPW与DPP-IV复合物结构稳定，体外实验表明三者均具剂量依赖性DPP-IV抑制活性。本研究为开发基于豌豆蛋白水解物的降血糖功能食品提供了理论依据。
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