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—— 中国食品杂志社
前期研究曾分离获得一种纯度均一的天然苦荞过敏蛋白(tartary buckwheat allergen a，TBa )，免疫检测发现其为苦荞中的主要过敏原。本实验采用定点突变的方法对得分较高的表位E1 的基因进行分子改造，构建5 个突变体L39R、L42R、L47R、V52R、L54R。在大肠杆菌BL21 中分别进行表达，经Ni2+-NTA 亲和纯化后得到纯度较高的重组突变体蛋白。ELISA 和点杂交检测发现，与突变前的E1 相比，突变体L42R、L47R、L54R 的免疫活性明显降低，这表明Leu42、Leu47、Leu54 在TBa 的过敏性中起着至关重要的作用。
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