制备抗羊骨骼肌肌钙蛋白T(skeletal muscle troponin T,sTnT)的单克隆抗体,评价单抗的特性。通过煮 沸提取、切胶纯化制备sTnT,融合后获得分泌抗羊sTnT的杂交瘤细胞株,用酶联免疫吸附测定法检测单抗效价、 亚型、特异性等。结果表明:筛选后获得3 株单克隆抗体(2E11、3D3、4C2),其中4C2特异性好,效价达到 15.12×105以上,为IgG1亚型,亲和常数(Ka)为1.1×109 L/mol;免疫印迹结果显示,该单抗能与牛、羊的骨骼 肌提取物反应,与鸡、鸭的骨骼肌提取物无明显反应,表明4C2可以用于区分反刍动物和禽类的骨骼肌组织。
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