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基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术建立3 种常见食源性革兰氏阴性菌快速鉴定方法
来源:导入 阅读量: 7 发表时间: 2026-05-20
作者: 张涛,张瑞,张雅伦,张子仑,张捷,周巍
关键词: 革兰氏阴性菌;基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱;快速鉴定;致病菌
摘要:

旨在建立一种快速鉴定3 种常见食源性致病革兰氏阴性菌(副溶血性弧菌、阴沟肠杆菌、鲍曼不动杆菌)的方法。采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术,探索不同预处理方法、不同培养基、不同培养时间对鉴定结果的影响。通过MALDI-TOF/TOF MS(二级TOF MS)技术优化检测方法,进一步研究不同培养基、不同培养时间的菌株对二级TOF MS鉴定结果的影响。结果表明,最适宜前处理方法为甲酸-乙腈提取法;一级TOF MS图显示,采用不同培养基培养的菌株鉴定分值和特征峰数量、形态均有明显差异;随培养时间延长,主要离子峰数量减少,导致匹配度降低。二级TOF MS图显示,实验菌株在不同培养时间主要特征峰无明显变化,二级TOF MS鉴定结果受外界环境影响较小,鉴定结果特异性更高。一级TOF MS法对特定培养环境和较短培养时间菌株鉴定有较高准确性,随着培养环境改变、培养时间延长,鉴定结果出现不稳定现象,而二级TOF MS法鉴定结果变化较小。相较于一级TOF MS鉴定,二级TOF MS技术对革兰氏阴性菌株鉴定结果稳定,杂峰较少,可作为微生物鉴定方法的有效补充。

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