
本研究以海南大叶茶为对象,对其红茶与绿茶进行提取,探究相应水提取物及其特征多酚对碳水化合物水解酶(α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶)的抑制潜力及抑制机制。结果表明,绿茶的总多酚(61.9 mg/g)与总黄酮(28.79 mg/g)含量及其对α-葡萄糖苷酶(半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)=59.10 μg/mL)和α-淀粉酶(IC50=14.21 mg/mL)的抑制活性均显著优于红茶。研究鉴定出9 种特征多酚,并通过分子对接筛选出表没食子儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、原花青素B2、山柰酚-3-O-芸香糖苷与鞣花酸5 种核心活性单体,其体外抑制活性和促进3T3-L1细胞葡萄糖消耗的能力均得到验证。机制研究结果显示,海南大叶茶中的茶多酚通过竞争性、非竞争性及混合型等多种方式抑制酶活性;荧光猝灭与分子模拟结果证实,多酚能以静态猝灭机制与酶活性中心(如α-淀粉酶的ASP-300/GLU-233及α-葡萄糖苷酶的GLU-296/ASP-269)通过氢键等作用力形成稳定复合物,其中表没食子儿茶素没食子酸酯-α-淀粉酶与原花青素B2-α-葡萄糖苷酶复合物稳定性最佳。本研究阐明了海南大叶茶(尤其绿茶)中的特征多酚可通过“抑制酶活性-促进消耗”双重途径调控餐后血糖,其核心在于与碳水化合物水解酶活性中心的多机制稳定结合。
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