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免衍生化离子对高效液相色谱法快速同步测定微生物发酵液中的γ-丁基甜菜碱
来源:导入 阅读量: 0 发表时间: 2026-10-08
作者: 魏琪, 陈鹏程, 吴丹, 郑璞
关键词: 发酵液; γ-丁基甜菜碱; 免衍生化; 高效液相色谱
摘要:

建立一种可快速同步测定L-肉碱及其前体γ-丁基甜菜碱的免衍生化离子对高效液相色谱法,优化前处理及色谱条件并进行方法学考察。结果表明,采用Amethyst C18-H反向色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以含2 mmol/L 1-辛烷磺酸钠的磷酸盐缓冲液(pH 3.0)与乙腈(92∶8,V/V)为流动相,柱温35 ℃条件下,L-肉碱及γ-丁基甜菜碱可在11 min内实现分离,保留时间分别为8.8 min和10.7 min。方法学验证结果显示,2个目标物在0.2~1.2 mg/mL范围内线性良好,决定系数均不小于0.998。L-肉碱和γ-丁基甜菜碱的检出限和定量限分别为0.133、0.229 mg/mL和0.445、0.766 mg/mL,加标回收率分别为89.87%~103.65%和89.23%~97.95%,精密度实验相对标准偏差均小于5%,表明方法具有良好的准确度和精密度。该方法简单快速、无需衍生化,可实现L-肉碱及γ-丁基甜菜碱的同步检测,可为L-肉碱发酵的代谢研究与工艺优化提供可靠的技术支持。

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