
采用橄榄油平板筛选法从棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)BNCC 19623冻藏干粉中分离得到一株高产脂肪酶优势菌株;通过18S rDNA基因测序、序列同源比对结合系统发育树分析完成菌株分子鉴定;在此基础上优化该菌株产脂肪酶的发酵条件,并系统探究其分泌脂肪酶的酶学性质。结果表明,筛选出的高产脂肪酶优势菌株为棘孢曲霉(A. aculeatus),最优发酵产酶条件为:发酵周期40 h、发酵温度28 ℃、橄榄油添加量5%、接种量4%、初始pH 6.5。在该条件下,脂肪酶活性达162.5 U/mL,较优化前(111.0 U/mL)提升46.4%。该脂肪酶最佳硫酸铵盐析饱和度为70%,分子质量约为32.5 kDa;最适酶促反应条件为:温度30 ℃、pH 8.5~9.0;在30 ℃水浴加热3 h,酶活性基本无损失,40 ℃水浴加热3 h,酶活性约损失30%;10 mmol/L Ca2+、Mg2+、Zn2+对该脂肪酶活性具有显著促进作用。本研究结果可为棘孢曲霉产脂肪酶的发酵生产及应用提供理论依据。
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