
以濒危植物马槟榔中的甜味蛋白Mabinlin II(M12)为研究对象,成功构建发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)介导的油菜(Brassica napus L.)毛状根异源表达体系,实现甜味蛋白M12的异源高效合成。利用质粒pCAMBIA连接M12编码基因,获得重组载体pCAMBIA-M12后由农杆菌介导转入油菜毛状根中,β-葡糖醛酸糖苷酶组织化学染色法和聚合酶链式反应检测确认表达体系构建成功。将转化后的毛状根在25 ℃、150 r/min条件下液体培养1 周后取出离心,回收沉淀并破碎,上清液即为甜味蛋白M12粗提物,双盲感官评价与电子舌检测评估M12粗提物的特性,其甜度最高可达4.89。本研究为甜味蛋白在植物细胞中的高效合成提供了新的方法,也为濒危植物资源的可持续开发提供了新的思路。
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