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4 个噬菌体裂解酶的克隆表达及活性分析
来源:导入 阅读量: 1 发表时间: 2026-06-10
作者: 叶文鑫,何嘉欣,Vivian Montero ALEJO,杨美艳
关键词: 噬菌体;裂解酶;基因表达;副溶血性弧菌;蜡样芽孢杆菌
摘要:

基于14 株新型烈性噬菌体(10 株革兰氏阴性菌噬菌体,4 株革兰氏阳性菌噬菌体)挖掘15 个裂解酶基因并对其进行序列分析,通过大肠杆菌BL21(DE3)异源表达系统,最终获得副溶血性弧菌噬菌体裂解酶LysCA8和LysBA3的纯化蛋白以及蜡样芽孢杆菌噬菌体裂解酶LysLY1和LysLY3的粗酶蛋白。其中,裂解酶LysLY1和LysLY3可高效广谱裂解供试的全部89 株蜡样芽孢杆菌,其宿主范围远大于其母体噬菌体(vB_BceS_LY1和vB_BceP_LY3分别仅能裂解其中的3 株和2 株)。裂解酶LysCA8和LysBA3在体外对供试的副溶血性弧菌无裂解活性,推测由环境适应性障碍及单域结构所致。针对革兰氏阴性菌裂解酶无活性的问题,未来将通过结构优化、分子伴侣共表达及嵌合酶设计,揭示失活机制并拓展裂解酶抗菌谱。

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