领学术科研之先，创食品科技之新
—— 中国食品杂志社
目的：以核酸适配体作为捕获探针、聚苯乙烯荧光微球作为信号探针，构建一种基于流式细胞术的益生菌制品中短双歧杆菌活/死菌的快速计数方法。方法：通过生物素-链霉亲和素介导的非共价结合，将短双歧杆菌核酸适配体偶联于聚苯乙烯荧光微球，制备靶向短双歧杆菌的适配体荧光微球。使用碘化丙啶对样本进行荧光染色，通过优化反应条件、染色剂浓度、荧光通道阈值等，建立流式细胞仪检测方法，并与国标方法进行比较。结果：当适配体质量浓度为1 mg/mL、荧光微球浓度为1 000 nmol/L、孵育温度为37 ℃、孵育时间为45 min时，适配体-荧光微球结合效率达到峰值。该方法在102～108 CFU/mL浓度范围内对短双歧杆菌的荧光信号强度与菌浓度对数值呈显著线性相关（R2＝0.991 9），检测限（limit of detection，LOD）为102 CFU/mL，优于常规的流式计数法（LOD＝1×103 CFU/mL）。该方法检测加标样品结果与平板计数法结果无显著差异（P＞0.05），方法回收率为98.00%～101.33%，实际样品检测相对标准偏差≤7.53%，且检测全程用时小于2 h，效率较平板计数方法效率提升超20 倍。结论：本研究建立的基于流式细胞术的适配体-微球方法具有快速、灵敏、准确的特点，能够有效应用于益生菌产品中短双歧杆菌的定量检测，为短双歧杆菌在食品加工、肠道微生态研究等领域的精准定量提供可靠技术。
2023年第44卷 2022年第43卷 2021年第42卷 2020年第41卷 2019年第40卷 2018年第39卷 2017年第38卷 2016年第37卷 2015年第36卷 2014年第35卷 2013年第34卷 2012年第33卷 2011年第32卷 2010年第31卷 2009年第30卷 2008年第29卷 2007年第28卷 2006年第27卷 2005年第26卷 2004年第25卷 2003年第24卷 2002年第23卷 2001年第22卷 2000年第21卷 1999年第20卷 1998年第19卷 1997年第18卷 1996年第17卷 1995年第16卷 1994年第15卷 1993年第14卷 1992年第13卷 1991年第12卷 1990年第11卷 1989年第10卷 1988年第09卷 1987年第08卷 1986年第07卷 1985年第06卷 1984年第05卷 1983年第04卷 1982年第03卷 1981年第02卷 1980年第01卷
电话: 010-87293157
地址: 北京市丰台区洋桥70号
版权所有 @ 2023 中国食品杂志社 京公网安备11010602060050号 京ICP备14033398号-2
