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—— 中国食品杂志社
为解决磷脂酰乙醇胺（phosphatidylethanolamine，PE）传统生产方法存在效率低、安全性差等问题，本研究通过筛选获得一株产磷脂酶D（phospholipase D，PLD）的嗜麦芽窄食单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia），克隆其编码基因smapld并成功实现异源表达。结构分析表明，SmaPLD蛋白的N端存在一个PLD超家族中非保守的柔性片段（残基1～52）。分子动力学模拟表明，该片段导致酶结构动态性增加、稳定性降低。通过理性设计构建N端缺失突变体（ΔN-SmaPLD），其结构刚性显著增强，底物结合自由能降低，催化活性大幅提升，PE生成率由野生型的26.37%提高至47.66%。进一步优化反应体系，在磷脂酰胆碱与乙醇胺物质的量比1∶3、水相与有机相体积比1∶2、反应时间8 h条件下，ΔN-SmaPLD催化合成PE的生成率可达93.25%。本方法工艺条件温和、绿色高效，可为PE的规模化制备提供新途径。
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