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—— 中国食品杂志社
在大肠杆菌Escherichia coli MG1655 ΔlacI中构建高效的肌氨酸合成途径。首先，质粒过表达来源于恶臭假单胞菌的β-哌啶-2-羧基还原酶基因dpkA，该酶能够催化乙醛酸和甲胺合成肌氨酸，通过单因素试验确定最适催化温度、pH值和细胞浓度；然后，敲除阻遏蛋白基因iclR和苹果酸合酶基因aceB，基因组过表达异柠檬酸裂解酶基因aceA，使得工程菌能够通过自身代谢积累乙醛酸；接着，分别通过基因组和质粒方式过表达6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因zwf，强化还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的供应，提高肌氨酸的发酵产量。最终得到的工程菌E. coli S6在5 L发酵罐中，能够以葡萄糖和甲胺为原料合成55.6 mmol/L的肌氨酸。本研究构建了高效合成肌氨酸的创新性微生物细胞工厂，通过代谢工程改造实现底物定向转化，为工业化学品的绿色化生产提供了可扩展的技术路径与理论框架。
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