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—— 中国食品杂志社
为了挖掘可高效转化大豆苷为大豆苷元的β-葡萄糖苷酶基因,该研究从云南元江94 ℃热泉微生物宏基因组中预测并合成β-葡萄糖苷酶基因,将其转化到大肠杆菌（Escherichia coli）BL21（DE3）中进行异源表达,研究重组酶的酶学性质,并将其应用于转化大豆苷制备大豆苷元。结果表明,从94 ℃热泉微生物宏基因组中挖掘到一个GH1家族的嗜热β-葡萄糖苷酶基因BglYJ446,其编码的重组酶命名为BglYJ446。重组酶BglYJ446最适反应温度、pH分别为85 ℃、7.5;在80 ℃处理8 h,相对酶活为57.77%;在pH 7.5~9.0的范围内稳定性较好（相对酶活>70%）。K+、Na+对BglYJ446活性影响较小,高浓度（10 mmol/L）的Ni+、Cu2+等其他金属离子,10%的尿素、吐温20及β-巯基乙醇抑制其酶活;BglYJ446在体积分数均为20%的甲醇和乙醇、2 000 mmol/L葡萄糖条件下相对酶活分别为168.21%、93.07%、36.83%。以β-D-吡喃葡萄糖苷（p-NPGlu）为底物时,BglYJ446米氏常数（Km值）为1.72 mmol/L,最大反应速率（Vmax）为1 164.56 μmol/（mL·min）。在80 ℃条件下,采用BglYJ446（0.15 U）可在60 min转化98.87%大豆苷。
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