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—— 中国食品杂志社
为克服传统方法生产高分子质量果聚糖效率低、成本高的问题，突破规模化应用制约，本研究以柠檬明串珠菌BD1707为对象，通过基因组挖掘鉴定出2 个果聚糖蔗糖酶基因Lc-SacB1和Lc-SacB2。异源表达与功能分析表明，Lc-SacB2（分子质量130 kDa，为目前已知最大果聚糖蔗糖酶）兼具转果糖基活性与水解活性，其具有高催化效率（Kcat/Km＝0.048 L/（s·mmol）），而Lc-SacB1仅保留水解功能且催化效率偏低（0.029 L/（s·mmol））。酶学性质对比显示，Lc-SacB2的最适反应条件（pH 5.5、30 ℃）与Lc-SacB1（pH 6.0、30 ℃）相近，并且Ca2＋对双酶活性均具有显著促进作用，其中Lc-SacB2的相对酶活力提升134%，Lc-SacB1的激活效应更强（155%）。核磁共振波谱与凝胶渗透色谱的结果显示，Lc-SacB2产物为高分子质量的β-(2,6)-果聚糖（4.0×106 Da）。结构分析表明，Lc-SacB1底物通道入口的loop区空间位阻可能抑制果糖链延伸，无法催化果聚糖生成，导致其功能分化。本研究可为新型酶资源开发与分子改造提供理论依据，有助于推动果聚糖高效生物制造的产业化进程。
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