
为实现发酵液中伊枯草菌素A的高效分离纯化,建立活性炭脱色联合多级层析梯度纯化工艺。以脱色率与产物回收率为评价指标优化活性炭脱色条件,再依次采用正丁醇萃取、HZ816大孔树脂层析与硅胶柱层析进行逐级纯化,同时采用熵权法对脱色率与回收率、纯度与回收率进行客观赋权并完成多工艺综合评价,筛选最优纯化方案。结果表明,优化后活性炭脱色工艺可实现发酵液脱色率65.37%、伊枯草菌素A回收率89.48%;经正丁醇萃取后产物纯度由3.91%升至19.23%,回收率83.19%;HZ816大孔树脂纯化后纯度升至35.36%,回收率66.21%;最终经硅胶柱纯化后产物纯度达84.66%,总回收率46.91%,整体纯度约为初始样品的21.4倍。本研究构建的脱色-萃取-树脂吸附-硅胶精制一体化纯化路线操作简便、纯化效果优异,可为伊枯草菌素A工业化规模化制备提供技术支撑,同时也为同类生物活性脂肽物质的分离制备提供参考依据。
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